Лигирование (ligation)

Лигирование (ligation) - Процесс соединения двух линейных молекул нуклеиновых кислот посредством фосфодиэфирных связей, осуществляется с участием фермента ДНК-лигазы. В генной инженерии лигирование – прием, с помощью которого чужеродная ДНК встраивается в плазмиду.

Комментарии^*

Дополнения к описанию лигирования:

Ключевые свойства механизма:
- Требует наличия 5'-фосфатной и 3'-гидроксильной групп на соседних нуклеотидах
- Протекает с потреблением ATP или NAD⁺ (в зависимости от типа лигазы)
- Обеспечивает ковалентное сшивание разрывов в сахаро-фосфатном острове
Практическое применение:
- Создание рекомбинантных ДНК для клонирования
- Сборка генетических конструкций в синтетической биологии
- Репарация одноцепочечных разрывов (ников) в клетке
Важные примеры:
- T4 ДНК-лигаза (из бактериофага T4) - наиболее часто используемая в лабораторной практике
- Термостабильные лигазы для ПЦР-методов
- Лигазы E. coli участвуют в репликации и репарации ДНК

^*Подобраны с помощью LLM, верифицированы, но возможны неточности.

Читайте еще